果树类植物的快繁技术示例

果树类植物的快繁技术示例

一、果树类植物的快繁;

(一)桃树的快繁

1.桃快繁的意
当前桃基本上采用嫁接繁殖,而且培育时间都是1~2年时间,繁殖效率不高,优良品种推广速度慢,难以适合产业发展对新品种的迫切需求。另外,一些需用特异砧木进行性状改良或提高适地性桃树品种,如抗重茬砧木GF677,需用营养体进行繁殖,通常采用组培法来培育,成本较高难以普及。还有些是栽培模式需要,如草地果园的台刈制度,就需要用快繁自根苗栽培。另外,桃用快繁自根苗生产具有提早结果与提前丰产的优良特性。这些技术的实施都得运用一种简易而实用的快繁技术,来解决生产上对种苗特殊需求,现就植物非试管克隆技术在桃树上的运用及快繁操作程序作些简单介绍。
2.母本培养与材料预处理
桃在常规条件下,属于较难生根培育的品种,这与植物种性及阶段性的生理状况有关,虽然桃的品种很多,各种品种生根难易与特性都有所区别,但采用非试管快繁技术后,可以让这种区别最小化,操作标准统一化。只有对桃树生根的障碍因子有所了解,才能制定快繁方案,影响桃生根的因子,因品种不同造成生根不同,而品种差异最终又是生长特性差异,造成离体材料生理状态差异来得以体现,所以不管什么品种,先对其进行母本园进行统一标准模式的管理,以缩小品种差异,

求得较为一致的生根效果。另外,母本不同生育阶段的差异,休眠期与生长期的差异,还有枝龄、叶龄上的差异,导致离体材料生理差异,这些也可以通过母本管理及预处理得以解决。现就从桃的品种品系分析来制定相应对策,北方品系的桃往往需冷量高,冬季休眠程度较深,南方品种休眠浅而需冷量低,而导致休眠深浅原因,又是在不同地域进化过程中形成的生态适应性,它通过体内脱落酸含量高低,来达到休眠深浅的目的,内源脱落酸是可以经管理与技术措施实现人工调控的,如在落叶后的休眠期快繁,在进行快繁前,对枝条最好采用人工致冷,打破休眠处理后再快繁,否则成活率极低。在生长季节快繁,影响生根的因子,主要是内源激素与碳源积累水平引起的差异,它表现为枝梢不同的老嫩程度及部位,这些可以对母本园进行枝梢的摘心处理,或增施pp333化控措施得以实现,也可通过肥水促长,重截促萌的方法来提高内源生长激素,或者结合外源喷施赤霉素与生长素来调控植株的生长发育。总之,培养营养充分,枝梢健壮,叶片浓绿的母本植株,是实现各种品种高效快繁的关键。另外,针对离体材料也可结合一些辅助措施,以达到适度调节的目的,如磁化水进行切口处理,可以使成活率提高,VB处理可以使内源激素的作用加速显化,切口的补糖处理可以让幼嫩材料总糖提高,促进切口细胞活化。深休眠的北方品种,冬季硬枝离体材料,还可以结合流水处理,以减少内源脱落酸及其它抑制生根物质。也可以采用高浓度的外源IBA处理,如1000ppm处理1~2小时,可以让极难生根的品种生根,通常较易生根的桃品种,采用10~15秒钟的速蘸即可,而带叶离体材料的生长季节快繁,只需采用100~200ppm吲哚丁酸处理,就可达理想效果。

3.接种快繁及苗床管理
把经药剂处理的离体材料,快繁于以珍珠岩为基质的智能化苗床中,早春基质温度低,是影响生根的限制因子,启动铺于苗床底部的加热线,进行自动加温,控制在15℃以上,在这样的基质温度环境下,离体材料接种后5天,形成层外侧由次生韧皮部薄壁细胞分化出初生根原基,15~20天即形成初生根,第25~30天经炼苗后即可移栽。在夏季绿枝离体材料快繁,空气温度的限制高温为35℃,当超过35℃即进行自动的微喷降温,一般绿枝离体材料快繁后7~10天即开始根原基发育,10~15天部份根原基突出皮层形成根系,15~20天根系基本形成,20~25天经炼苗后就可移栽。在生根过程,生根快的大多是具有充足的营养积累的粗壮材料,与叶片光合功能良好的材料,因在生根过程中需大量的可溶性糖参予代谢,才能使根原基基因启动,所以对于一些较难生根的桃品种,可用磁水处理以提高α-淀粉酶活性,对生根具有良好的催化功能,再加上磁化苗床与磁化弥雾的综合作用,一些平常环境较难生根的品种,也可得以有效的解决。
在苗床管理上,一般只需启动智能控制系统的专家模式即可,如遇一些过嫩的材料,还可结合强制补充碳酸水与富氧水,也能促发其生根。在日常管理上,如遇一些落叶或腐烂材料要及时清理,并在周围用电功能水消毒,用局部浇施法进行,以防交叉感染。

4.技术提要
桃不管什么品种与品系,只要了解其生根特性,分析限制因子,制定相对应的操作流程与解决方案,都能达到80%以上的生根成活率,一些较难生根品种,通常以童性较强的幼苗作为母本,实现以苗繁苗,都能使生根基因得到激活。而且随着循环代数的增加,生根时间会越来越短,这种生根特性,不管是桃上或其它果树上都遵循着这个规律。
(二)龙眼的快繁技术摘要
龙眼常规育苗通常采用嫁接育苗,速度慢且会出现砧穗亲合不好,而出现早衰现象严重,高压苗则移栽成活率低,且对母树损伤太大,繁殖系数不高等。针对上述问题,研究成功非试管克隆技术,比嫁接育苗可提早1年左右出圃。有效地提高了育苗速率和繁殖系数,大大加快了龙眼的产业化发展对种苗的需求。
龙眼属于极难生根的品种,主要是由于休内含有大量抑制生根的物质,再加上其生根类型为愈伤组织生根型,在苗床时间较长,一般要60~80天左右才可移栽,所以在管理上及生产成本上,比其它种苗要求要严。针对难生根植物可采用与建立以幼苗为母本的离体材料采集园,而且要进行精细管理以促发健壮活力强的壮枝为离体材料,在夏季光照过强时,还需对母本进行遮光处理,就是盖遮阳网,这对于减少体内抑制生根物质较为有效。另外,还需进行快繁前的母本树的基因激活处理,叶片表面喷施叶面肥或生长激素,使快繁时离体材料能处于优势活力状态。

在离体材料制作时,以带有2~3小叶的双芽材料为佳,特别是对这种含有抑制生根物质的品种更宜小些,但也不能过小取单芽,因单芽的离体材料过小,对外界环境变化的适应与抗逆性差,无疑就给长时间的苗床管理带来难度。以带2~3小叶的双芽材料为最佳。制作材料时与其它植物相同,但在取材时一定要选择半木质化的材料,也就是选浅绿、深绿及浅褐色的材料,木质化不宜过高,木质化程度越高,体内积累的抑制物质相对也越多。
制作好的离体材料,用200ppm的IBA处理1~2小时,最好以磁化水来配制生根促进液,这样效果会更佳,处理后的材料立即繁于以珍珠岩为基质的智能化快繁苗床中,调好系统设置即可。在管理期,除了常规管理外,可以每隔7~10天向叶片喷施一定1~5ppm的IBA溶液,可以加入营养液一起补充,还可加入1~3ppm的复硝酚钠,作为细胞活化剂混入营养中,起到促进细胞活化,快速恢复分裂与分化的作用。在夏季强光高温下,还需用遮阳网进行适度遮光,以60%~70%的透光度为好,同时也要阶段性地补充富氧水与碳酸水。经过上述综合技术措施后,一般龙眼的生根成活率也可达80%以上,是当前用于龙眼无性苗培育的各项技术中,成活率最高的一种繁殖技术,可以在生产中推广与普及。
(三)番木瓜的快繁技术

栽培番木瓜时所使用之苗,如由种子经播种、发芽而成的均称为实生苗。目前为止的番木瓜栽培,无论是那一个品种都用实生苗。番木瓜因遗传因子复杂,品种中实生苗的性状表现,因播种时的父本与母本植株性状不同而差別甚大,如台农二号为一代杂交种,采种时以两性植株为父本,雌性植株为母本,则其后代种子中,实生苗有50%为两性株,50%为雌性株,如改变父母本植株性状时,采种后之实生苗植株性别则变化甚大,两性植株、雌性植株或雄性植株均有出现机会,此等实生苗植株性状的鉴定,至目前为止还是无法分辨,必须等到生长至开花期时。

 

一般农民栽培番木瓜时,两性植株不需再用人工授粉即可结果,而雌性植株因本身缺少雄蕊花粉,所以人工授粉是必须的。由于番木瓜鲜果的消费市场,对两性植株所结的两性果(俗春果)比较偏好且价格高,而雌性植株所结之雌性果(俗称母果),因肉薄种子多,比较不受消费者的欢迎而价格较低,所以栽植同一番木瓜品种时,以增加一倍栽植密度的方式,等植株开花时,再将雌性植株砍除,余下的则均为两性植株,不但可省去授粉的工资,且都能生产消费市场所需的两性果。

采用非试管克隆可事先知道母本的性状,可有针对性地快繁优良母株及两性植株,可大大降低生产成本及提高果实品质,是目前最为有效的番木瓜繁殖技术,它的推广应用将对番木瓜生产带来重大的实际意义。现把有关快繁技术简介如下:
选番木瓜优良植株后,于四月至九月间将顶芽切除,平均经25天后,在紧临顶芽切口下方树干的侧芽,会伸长出5~7支长30~40公分之侧枝,将此侧枝自基部切取并留 3~5 片叶,切口以 IBA2000ppm 处理,再快繁于由蛭石+珍珠岩以 1:1 配合而成的基质中,开启智能系统,平均经20天即可发根,再经10天复壮即可定植于田间。
当靠近顶芽的侧芽收获后,可将此段着生侧芽的树干切断,则切口以下的芽眼可再发芽生长为侧枝,如此顺序下去,每一植株在四月至九月中能有四次培养侧枝,其侧枝总生产量平均24支,但当取一叶一芽为材料时,又可增加数倍,但培育的苗规格较小,在母本较少时,采用一叶一芽。当树干被切至离地面约30公分高时,可再重新培养树干,以供来年继续做侧枝之培养。由树干上培养侧枝,快繁生根率可达 100%,生根的时间较短,秋冬季则因温度低,侧枝不易培养,且发根率平均仅85%。
由同一种植株所培养的侧枝快繁苗,因为无性繁殖,其特性均与母株一样,亦即母株为两性株,取其繁殖的快繁苗均为两性植株,不会再有雌性植株或雄性植株出現。这样就可以生产上大大降低成本,提高经济效益。
二、园林绿化类植物的快繁;
(一)马褂木快繁技术

马褂木(又名鹅掌楸)生长快,材质好,叶型奇特,树干挺直,人工杂交培育出来的杂种马褂木,树形美观,叶型奇特,花朵艳丽,秋叶金黄。具有抗病虫能力强,本身凋落物无污染,速生、材质优良,且适应能力强。是我国著名的优良用材、绿化树种。但由于结籽率低,一般只有1%~3%;扦插难度大,生根率通常不到30%;加上种子处理等育苗技术不当,种苗生产率很低,严重制约这一优良阔叶树种的发展。

为解决这一生产实际问题,采用植物非试管克隆技术可达93%以上的成活率,现把有关技术简介如下:于早春萌芽前可取7~8厘米的枝段作为离体材料,并用200ppm的吲哚丁酸溶液浸泡2~4小时,繁于智能苗床即可,一般15天开始形成愈伤组织,25~30天形成根系,成活率达95%以上。
生长季节取一叶一芽作为离体材料,用100ppm吲哚丁酸处理1~2小时。繁于智能苗床,以叶片不重叠为准,一般20~25天生根,30~35天就可移栽。根系发达成活率高,是马褂木繁育最为实用的技术。
(二)红枫的快繁技术
通常红枫采用种子和嫁接育苗,繁苗周期长,传统扦插又难以成活,而采用植物非试管克隆技术可以取得很高的生根成活率,是实现红枫快繁最为有效的技术,红枫属难繁殖品种。
快繁基质最好使用蛭石或珍珠岩,在全光照的智能苗床条件下,可达到较好的生根效果。因为在全光照下条件下,不影响红枫的光合作用,离体材料的蒸腾作用和水分的供给处于平衡状态。同时,萘乙酸能加强离体材料的细胞组织活动,促进离体材料根原体的分化,提早生根。
离体材料的选择和快繁红枫的离体材料要求健壮粗实,直径在0.5~1cm,半本质化为上等,嫩枝为中等,老枝为下等。每段长约5~10cm,留叶1~3片。同时,叶片还要修剪,一片叶子还要剪去1/3或1/2。离体材料下端剪成斜口,必要时可刻伤基部皮层,用500~1000ppm的萘乙酸浸泡5~0秒钟。也可直接取红枫的一叶一芽枝段作为离体材料,切口用100ppm的吲哚丁酸处理2小时。在操作过程中,尽量做到随剪、随处理、随接种,如果离体材料离苗床较远,剪下的枝条,要用湿毛巾包好,防止离体材料失水,影响快繁成活。

红枫,过去人们一致认为无性繁殖难成活率低,所以,很少采用无性繁殖方法培育种苗,大多采用传统嫁接。经试验证明,红枫的繁殖是可以用无性快繁这种方法的。只要满足红枫的生长习性,创造生根的条件,其离体材料成活率至少在85%以上。红枫快繁成活的关键,是满足离体材料的全日光照、水分、温度和通风等要求,采取全日照智能苗床。快繁成活率可达95%以上。红枫快繁生根后,发育较快,通过炼苗即可移栽大田进行复壮培养。
三、经济作物类植物的快繁;
(一)马铃薯快繁技术摘要(适于原种生产用苗)
马铃薯的许多病害是以种薯块茎为传染源,且用块茎繁殖不仅繁殖系数低,不能满足栽培者对良种供应的要求。采用非试管克隆技术,除繁殖率高外,还可以防止块茎传染的各种病害,特别对黑痘病,用一般防治手段难以根除,而用枝叶快繁的方法却可培育出无病植株。马铃薯的快繁技术路线有两条:
1.茎繁
使用顶芽和茎段快繁。可以直接快繁于蛭石或珍珠岩的智能苗床,也可采用气繁催根法,待发根后再移栽至基质,这样成活率高,能防止缺株。方法是,3月中旬把良种薯块种在温室里,5月中旬切取顶芽快繁,同时促使多发侧芽,当枝条长到10厘米左右时,即可切取长约5厘米的顶芽茎段为离体材料进行快繁。于智能苗床环境下一周即能发根,6月初能定植,80天即能收获,单株产量达600克左右。
2.叶繁
     (1)直接产生块茎的方法:即不让发根,直接生产块茎,再以小块茎作种薯。1月下旬从去年11月下旬种植在温室内的母株上,采取一叶一芽材料接种入珍珠岩苗床内,把腋芽埋入基质,叶片留在床面上,经20天左右在叶腋处形成小块茎,此法是依靠切离母体后的叶片自身所含养分和来自外界的光、二氧化碳和水生产出块茎的。为增大块茎,需给叶片进行营养液补充,以增加块茎所含的养分。这种用叶片直接生产块茎的方法,也可用于茎繁,但从一株茎上要获取更多的离体材料来考虑,还不如叶繁的方法更有实用价值。

(2)发根后定植法:把发根后的植株,直接定植到圃地里去,其操作和茎繁操作基本一致。定植后的初生期生育要比茎繁的迟,这是因为它发根少,而植株体积又较小的缘故。但以后生长发育状况和茎繁的一样,均从茎基发出强有力的侧枝。80天收获,每株块茎4个,约500克左右。
马铃薯快繁苗的单株产量,因发根程度而不同,发根好的,定植后成活快,茎叶生长发育早,株产可达600克以上。因而要提高快繁苗的产量,争取多发根、早成活确是关键,所以在快繁时结合药剂处理有促进作用。
经试验研究了不同浓度萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)、赤霉素(GA3)混合使用对马铃薯快繁成活的影响。结果表明:以浓度NAA50ppm+IBA50ppm+GA350ppm的处理为最佳组合,成活率最高,生根最好,长势最强。
在快繁中,不论茎繁或叶繁,在10~20天内,均出现三种情况:一是在离体材料基部的腋芽部位只形成块茎不发根;二是又发根又有块茎;三是只发根不长块茎。
离体材料之所以发生这三种现象,和植物激素之类物质有关。如在茎繁时发现第一种情况时,在移植时可切去块茎,有时也可发根;遇到第二种情况也要切去块茎,即能顺利生长。
(二)网纹甜瓜
因网纹甜瓜种子价格昂贵,为了降低种子成本,采用提前播种育苗,待瓜苗长至一定高度时,取一叶一芽或带叶瓜蔓为离体材料,切口用100ppm的吲哚丁酸处理1小时,快繁于以珍珠岩为基质的智能苗床,

一般8~9天生根,补施营养液壮苗后,即可移苗定植至大田,成活率达100%,如果建立无性系快繁体系并采用多代循环技术,可周年进行工厂化育苗,大大降低育苗成本,这是目前投资最少的网纹瓜工厂化育苗技术,通过2002年的试验栽培表明,快繁苗具有生长势整齐,结果性状及产量、质量与种子播种苗无异,是网纹瓜种苗生产较为经济的育苗新技术
(三)黄瓜、西瓜及番茄快繁技术
这三个品种都属极易生根品种,在智能化的快繁苗床内无需任何药剂处理,就可达100%的生根成活率,操作时只需截取带叶的茎蔓,快繁入以珍珠岩为基质的苗床中,开启系统即可,一般3~4天开始出根,7~10天就形成发达根系可以移栽大田。这些离体材料大多在植株上的时候就已形成根原基,所以一遇适

宜环境马上就形成根系,像西瓜最快时,第二天就出根,这些品种在生产上运用具有重要的价值与生产意义,利用多代循环技术可以让一颗种子产生几十万株甚至上百万株种苗,可大大降低种子成本,而且快繁苗根系比种子苗发达,结瓜挂果期大大提前,产量与品质都有所提高,是今后生产上普及推广的一项重要技术。
四、药材类植物的快繁;
(一)曼地亚红豆杉快繁

曼地亚红豆杉因其含有可提取的抗癌药物,而成为当前重要的药材在全国大范围地发展,种苗的需求量越来越大,单凭传统扦插繁殖,难以满足生产需要,一般一年只能培育一批,而采用非试管克隆技术后至少可培育5~6批,而且成活率与苗的质量都大大地提高,更为重要的是快繁苗可进行周年移栽、周年定植、年发展。

一般取3~5厘米长的带叶枝段作为离体材料,材料紧缺时还可以更小,甚至1~2cm皆可,切口用100ppm的吲哚丁酸处理2小时,快繁于由计算机智能控制的快繁苗床,7~10天形成愈伤组织,25天开始生根,35~40天即可炼苗移栽,成活率达90%以上。另外,在生产中发现,电场处理对于提高根冠比,加快生根速度,培育壮苗效果极为明显,是非试管克隆技术在曼地亚红豆极上的运用是实现红豆杉产业化发展最为理想的技术,是其它任何一种方法不可比拟的。
(二)金银花
金银花一直颇受药业界重视的大宗中药材,也是一种可制成茶类使用的日常饮品,随着研究开发的深入,它的用途越来越广,特别是非典之后,更在全国掀起了发展金银花的热潮,依靠栽培金银花致富创汇的山区农民,更激发了产业化发展之热情,而种苗的培育光凭嫁接与扦插,已不能供应山区农民,发展金银花基地的需要。采用非试管克隆技术,不仅能使传统易扦插成活的金银花品种,大大提高繁殖系数,还能让传统只能靠嫁接培育的优良品种金银花王快繁成功。
目前用于生产栽培的金银花品种较多,大多数属于易快繁培育的品种,一般在不需用任何药剂处理下,都可获得极高的成活率,而且10~15天就可生根,20~25天可全面移栽定植。但也有一些品种采用传统方法不能扦插成活,只能依靠嫁接,而且嫁接成活率也不高。这可能与高产品种体内含有过高的绿原酸有关,是目前金银花王难繁育的技术难题所在。针对这个问题,采用非试管克隆技术的繁育体系可得以解决,现已在生产上被大面积运用,现把技术总结如下:
金银花王为普通金银花的变异品种,表现为单株产量极高,生长势偏弱,常会出现花量过多而影响营养生长。这种品种在快繁过程中,常出现愈伤组织过于发达,出根少而慢,并且在快繁过程中常出现叶片早期脱落。针对这些问题,我们进行了综合分析并制定了相应的措施,使快繁的成活率得以大幅度提高,基本能满足生产上的技术要求。原本金银花王在采用嫁接时就会出现与砧木间的后期不亲和性,出现掐脖子苗,遇大风易于嫁接口折断,这就成为限制该高产品种发展的主要因子,如用传统扦插又不能成活。这些现象说明,该变异品种与原来普通品种间有遗传基因间的差异,这在嫁接不亲和上就得以证明,另外,这品种花量过大,导致体内绿原酸含量过高,生长过弱又造成内源脱落酸含量骤升,这三方面组合在一起就成为它难生根的综合生理因子。

首先在母本管理上,要以培养营养生长旺盛的壮苗幼苗为主要管理目标,可以通过适度遮光栽培与多施氮肥来降低花量与绿原酸的含量。也可以通过花芽分化期喷施40~100ppm赤霉素来减少花量,因花量越多的植株,叶片营养积累越少,同时还会大大提高绿原酸的含量。绿原酸是衡量金银花品质的主要指标,但同时也是造成金银花王难繁殖生根的主要因素,通过降低光照强度,可以减少植株枝叶花内的绿原酸含量。另外,增施氮肥可以使绿原酸含量降低32.99%~6.78%,而增施磷肥会使花量大幅度增加的同时,更会让绿原酸含量大幅度提高,可达8.68%~14.44%以上。这些研究表明,母本园须采取少施磷肥而多施氮肥的管理方法,这样的施肥管理措施,还可以使植株体内的内源生长激素提高而脱落酸得以下降,所以母本管理与常规以生产为目的的管理要恰好相反,这样才更有利于生根。

除了采用母本园特殊管理外,在快繁中还会出现叶片早衰脱落问题,针对这个问题可以在母本管理或快繁期,阶段性地向叶片表面喷施生长激素,起到延长叶龄以防脱落的作用。生产发现,凡是叶片一直保持未掉落的离体材料迟早都会生根,而脱叶的材料马上就停止发育,快繁补充营养液时,可于营养液中添加1~5ppm的吲哚丁酸或者1ppm的复硝酚钠,这对延长叶龄提高成活率有一定效果。

经上述综合技术管理后,就可进行快繁操作,取带1~2张叶片的枝段作为离体材料,切口用200ppm的IBA处理1~2小时,然后快繁于珍珠岩的智能化苗床,除了运用常规所具的管理技术外,最好结合碳酸水与富氧水补充技术,这措施对于难生根植物特别奏效。另外,也可用气雾法快繁,也叫雾增殖法,让切口暴露于配有营养的气雾中,这样生根会更快。据试验表明,金银花王采用珍珠岩基质快繁,要30~45天生根,而采用气雾繁即雾增殖法,22天就生根,而且成活率可达80%以上,但气雾繁也有个缺点,还需建立专门的炼苗区,进行移栽炼苗,因在气雾中形成的根大多为气生根,要适应土壤环境还需一段时间的驯化。
金银花应用范围之广,其中制作成金银花露是它的作用之一,也是应用最广的范围之一。利用植物非试管快繁技术繁殖育苗,大大提高了金银花的产量,也促进了金银花产业化发展的进程。
五、花卉类植物的快繁;
(一)迷你玫瑰
迷你玫瑰是当前作为迷你型盆花生产、水培花卉及试管花卉生产的极好原材料,也是庭院阳台绿化美化的优良品种。它的繁殖除了传统的扦插外,最为快速与高效的方法就是采用非试管快繁技术,它可以使一叶一芽的离体材料,在一年的时间里,经多代循环技术可扩繁出几千株商品苗,而且操作简单方便,生根时间短而成活率高。取迷你玫瑰植株上的一个带叶枝段、一叶一芽或者带花蕾的顶梢作离体材料,切口用100ppmIBA处理1~2小时,快繁于珍珠岩为基质的智能化苗床中,通常情况下7~10天开始生根,15~20天即可移栽,生根成活率可达95%以上。采用迷你玫瑰为材料进行带蕾微材料快繁,待其生根后,再接种至试管内的琼脂基质环境中生长,就制作成一株能在试管内生长开花的试管玫瑰,是当前国内外试管花卉中之精品,也是情人节赠送的最佳礼物。

(二)蝴蝶兰快繁技术
蝴蝶兰通常种子育苗、组培育苗、分株育苗方法,其中种子育苗开花时间长,组培育苗成本高,分株育苗效率低。而采用非试管克隆技术后,可大大降低蝴蝶兰的生产成本及提高繁殖系数,是目前最为有效实用的技术。现把有关技术简介如下:
离体材料的选择及诱导制作:蝴蝶兰的根茎叶芽皆可作为离体材料进行快繁,但在天然条件下,蝴蝶兰的芽为潜伏休眠状态,通过人工药物处理之后,这些芽就会进行细胞分化,萌发为小芽,再用通过消毒的刀片,把小芽切割成为一个独立的离体材料,尔后繁殖于受计算机控制的智能苗床, 所以小芽的诱导就成为蝴蝶兰快繁的一个重要技术环节,现把几种小芽诱导方法介绍如下:

(1)切茎诱导法:蝴蝶兰是单茎类植物,自直立的茎向上生且生生不息,在它的叶腋茎部虽有潜芽1~3个, 但多不能生芽成株,但待植株生长较大后,可以自丛叶下丛生根之间,用消毒过后的刀或剪切断 , 上部有根者栽入新盆或是假植 , 使其继续生长,下面留有根茎部份,予以适当水份,不久之后即可萌生新芽 1~3 个 ( 看株性及管理方法而定 ) , 如茎株过长,亦可分切多段,只要每段长在3厘米,以上并有根一条以上者每节均可发出1~2芽,用刀片切下小芽,繁于智能苗床,一般10~15天即可生根移栽。
(2)药物刺激法:此种药物在花市即有出售, 成份主细胞分裂素, 为油腊质 , 使用时可将此剂以牙签沾取 , 涂抹在休眠的芽点, 药物即可渗入刺激发芽 , 当芽体顺利长出后,即可切下快繁。
(3)花梗蘖芽:有许多品种的蝴蝶兰, 其花梗上的基部,未开花的梗节处及顶尖,有萌生蘖芽的习性,原生种如 P.lueddemanniana , P.schillerana , P.equestris等,花梗最前端萌生出蘖芽后,切下繁于智能苗床,待其成长发根即可移植成为新个体, 如无梗蘖性者, 即可使用含植物激素的催芽剂涂抹在蝴蝶兰花梗的节点处, 用药刺激来达到繁殖新苗的目的, 涂抹药剂前, 先将花梗节上所包覆的苞片以刀片去除,去除苞片时须小心,避免其的芽体弄断,苞片去除后, 涂抹摧芽剂,使用植物激素催芽剂,最好是在植物生长期时,气温在20℃以上效果会较佳。
六、经济林类植物的快繁;
一、油茶优系快繁技术
油茶是种重要的油料植物,也是山区农民的一种重要的经济植物。但长期的种子播种育苗,使品种混杂,退化严重,产量下降,结果期晚,大大影响了油茶的产业化开发。
在设施大棚情况下,可实施油茶的周年快繁与多代循环,生产效率较高,生根成活率较有保障,是其它嫁接扦插所不可比拟的,是当前油茶产业化发展,是必不可少的一项种苗培育新技术。现把技术要点介绍如下:离体材料应选择优良母树上1 年生粗壮、已木质化、腋芽饱满、叶片完整、无病虫害的枝条, 截成带有一芽一叶长约4 cm左右的离体材料。取材宜在清晨进行。取材后要将离体材料50~100根捆一扎, 并注意保湿。快繁前, 要用ABT生根粉对离体材料进行处理,以促进切口愈合及快速生根。快繁时, 离体材料要求直立接种, 芽和叶要露出基质, 叶面要朝上, 离体材料株行距为5 cm X15 cm左右,以叶片不重叠为准。接种操作完毕后, 立即开启智能系统。
经实践表明,用ABT1号生根粉处理油茶离体材料, 其成活率、当年抽梢率显著高于200 ppm浓度萘乙酸处理效果;生根条数、根系之长度也比萘乙酸处理的多而长。 成活率可达85%以上,采用以苗繁苗的多代循环技术后,成活率还可提高,生根时间还可缩短。通常第一代苗,10~15天形成愈伤组织,20~25天形成根源基,30~45天形成根系移栽大田,如果采用以苗繁苗操作,会激发童性及生根基因,生根时间可以缩短至20~25天,效率更高,速度更快,所以油茶苗快繁时,幼化的母本园建设是极为重要的。

另外,药剂处理时以高浓度ABT1号速蘸为好,操作效率高且成活率好。高浓度ABT1号生根粉溶液速蘸与低浓度慢浸法比较, 以前者之成活率、生根数量优于后者, 最好的组合处理为500 ppm浓度的ABT1号, 速浸10秒种后快繁。用ABT2号生根粉处理油茶离体材料, 其成活率和生根数量也都优于200 ppm浓度萘乙酸处理的效果。速蘸法与慢浸法二者相比较, 也以高浓度速蘸比低浓度药剂慢浸法效果好。ABT生根粉以200 ppm浓度溶液, 速蘸20秒为佳。ABT1号生根粉与ABT2号生根粉相比较, ABT1号处理油茶离体材料成活率明显高于200 ppmABT2号, 但同浓度的ABT2号产生的效果则与萘乙酸处理的效果差异,不达显著水准, 故综合考虑, 在油茶采用非试管克隆育苗, 宜选用ABT1号生根粉, 并采用较高浓度(500ppm)速蘸法。
二、油茶的应用
红花大果油茶为山茶科常绿小乔木,树高3-6米。是珍稀名贵的木本油料树,茶油橙黄,色清透明,气味芳香,含不饱和脂肪酸比花生油、菜子油高,不含芥酸。山俞酸及黄曲霉素等致癌物质。常食油茶可以降低人体血脂及胆固醇的含量,对高血压、中风、脑血栓、癌症等病有防治效果,是纯天然的绿色保健食用油,质量好。
如近来特受欢迎的藏秘排油茶,就是油茶的应用之一,它充分体现了油茶的应用在市场上的位置,也大力发展了油茶这一经济作物的作用。
七、濒危植物类植物快繁;
(一)濒危绝种植物——百山祖冷杉快繁技术
百山祖冷杉是濒危绝种的珍稀植物,因采用传统方法繁殖成活率很低,一直是林业工作者拯救该种质资源的一大技术难题。但采用植物非试管克隆技术,可取得相当高的成活率,现把有关技术简介如下:离体材料来自浙江省庆元县百山祖,把离体材料截成长3~5cm的带叶枝段,并用1000ppm的吲哚丁酸处理切口8~10小时,然后繁于智能苗床。据观察,25~30天皮层胀开,开始形成愈伤组织,45天部份有乳突状的根原基长出,60~70天,大部份长出1~2cm长的根系,检查成活率达90%以上。

(二)金花茶的快繁技术

金花茶含天然有机锗、硒、锰、钼、钒、锌等十多种对人体有重要保健价值的微量元素和茶多酚,以及人体必需的氨基酸,具有防癌,抑制肿瘤生长、降血胆、降低胆固醇、防止动脉粥样硬化、延衰老、提高机体免疫功能等保健功能,是种极具开发价值的保健饮品原料植物。另外,金花茶其花蜡质金黄、金瓣玉蕊、鲜丽悄致,点缀于绿叶琼枝间,风姿卓绰,被誉为花卉中的“超级明星”、“茶族皇后”和植物界的“大熊猫”,是国家一级保护珍稀植物。金花茶除具有极高的观赏价值外,是茶花中的极品。

广西金花茶为一级保护植物,对金花茶和离蕊金花茶进行了快繁试验。前者用生根粉(ABT)1号200ppm处理,1年生离体材料在珍珠岩基质上,不带叶扦插的成活率为0,带1片叶的成活率在85.0%~87.8%之间,对照为72.0%;2年生的成活率为20.5%。后者在珍珠岩基质上,用生根粉1号150ppm处理,1年生离体材料在珍珠岩上的成活率最高,为97.5%。 所以生产上建议采用1年生的幼苗作为母本,进行以苗繁苗的多代循环增殖,可取得良好的育苗效果。

植物快繁技术简介

所谓植物非试管高效快繁技术也就是植物克隆技术,也有人称之为植物非试管快繁技术、植物快繁技术、植物全光照喷雾育苗技术、全光雾插技术、微材料或微组织扦插育苗技术,喷雾育苗技术、喷雾扦插育苗技术、傻瓜克隆。无论叫做植物快繁还是植物克隆其原理和方法是一样的。

植物克隆技术(植物快繁技术)的关键是喷雾,十几年前就有权威单位推广全光照喷雾育苗技术,实际上也就是后来有人称之为植物非试管高效快繁技术,而现今更多被称为植物克隆、傻瓜克隆等时髦词汇。过去开发的喷雾全套设备是机械式,成本高达数万元,且容易锈蚀和损坏,一段时间后就没人再使用,而自从引进以色列微喷(头)技术后,微喷雾问题顺利以低成本形式解决,于是植物克隆技术(植物快繁技术)得以在全国迅速推广普及。

植物快繁技术(植物克隆技术)的推广的另一障碍就是自动控制仪的问题,进口的温湿控制设备好用但价格高,所谓的农业智能化计算机系统除了价格更高之外还总是不能成熟,使用起来问题百出,经常造成育苗的失败,笔者使用两年后才不得已开发了国产育苗仪,其低廉的价格和丰富实用的功能很快被全国同行赏识。

植物克隆技术(植物非试管高效快繁技术)现在的投入只需2000余元,大力推广植物克隆技术、植物快繁技术利国利民。

植物傻瓜克隆技术与植物组培试管快繁和传统育苗技术相比,具有以下先进性:

1、用一叶一芽植物外植体为繁殖单位材料,直接接种在大田沙床或营养袋中,一次成苗直至供应生产,不需任何移动,成活率高。

2、无论南方北方.不同纬度不同土壤.不同气候,一年四季都可用此法连续快繁,从第二代起多数品种均可达6―12代。一年中365天任何时间都可用此快繁技术启动生产,拓展了技术应用的时间和空间。

3、技术操作容易推广。经过一段时间培训合格的普通劳动力每天(8小时)可接种3000--5000个单位材料。长期推广实践证明:一是对生产技术人员素质要求不高,技术培训期短、适应性极广,易于推广;二是个人操作速度比组织培养快繁和常规育苗均快,如组织管理得当,在其他条件满足的情况下,每天每个基地可快速接种20万--100万个单位繁殖材料,技术易于大面积推广,这是试管快繁技术所不可比拟的。

  4、经过有计划培训一段的普通人员即能参加快繁操作工作,接种速度极快(超过组培试管快繁接种速度好几倍,从第二代起多数植物既超过了超过常规育苗操作速度,也超过了试管快繁的操作速度。极大地节约了人工开支和提高了劳动效率)。

      5、每个经过一段培训合格的技术工人每月可生产管理2-10万株苗木,每个骨干加上一定数量的辅助工人每半年至少可生产30万株幼苗,创经济效益极高。

6、多数植物利用植物傻瓜克隆技术培养到第2代以后,4-11天即可获得完整再生植株,再生植株率达90%以上,真正实现了高效快繁。有些科属植物生根繁殖情况特殊,如鸡毛松、云杉、红豆杉、油樟、岩桂、中国兰草、牡丹等生根持续时间较长。但仍然比试管快繁和常育苗要快,综合快繁效率要高。

7、多数植物从第二代后,每一再生植株每30-60天繁殖一代,每代增殖系数为2-15倍(在原种植物数量基数上按几何级数高效增殖)。这一点比组织培养试管快繁的优点还突出。越到后面的代数,繁殖的种质资源材料越多,繁殖的速度越快。

      8、技术步骤少,所用时间短,极大地节约了综合生产成本和提高了人员的生产效率.从微型材料开始繁殖,可直接培育出在自然条件下生长的植株,不需任何移栽对多数植物仅需要15-60天的培育即可用于生产栽培,而且植株均表现开花结果早,丰产性好。(如西红柿,4天开始生根,20天开花结果,枸杞当年在苗圃地就开花结果,脱毒薯一叶一芽材料从接种至40天就能分化出小薯,当年栽培可直接在大地收获大脱毒薯。脱毒薯幼苗当年大田栽培产量可达3至4吨,不仅给农民每亩地可节省300斤种薯,而且可是农民每年都能种上原种种薯.切花月季不需移栽从接种一片叶起70天就开花,花大而艳,开花周期比其它方法培育要长。针叶树种如红豆杉、北美红杉、川西云杉、日本落叶松等一般上山定植需4个月的时间。第一代一般20-40天开始生根,第二代后生根时间约缩短三分之一的时间。而针叶树种有许多植物组织培养难度很大,基本上不能大规模生产。常规扦插又存在着生根慢、成活率低。致使这些品种的苗木一直在用种子繁殖,后代性状变异非常大。

9、此法培养的成熟种苗,纯度高、无病虫、根系发达完整、根长25厘米以上,根数在3-6根,成熟芽饱满,茎高20-60厘米,定植生产大田成活率90%以上。针叶树种5厘米-15厘米,上山定植一般成活率高达95%以上。

10、在植物生长季节中直接接种培养在营养袋中的绿苗纯度高,无病虫,生长3-5片叶以上,腋芽饱满,发枝能力强,根系发达,炼苗质量高,定植生产大田成活率达95%以上.

11、对许多植物来说,第一代就很正常。立即就可以进行大规模快繁生产。但有些难繁殖的植物从第2代才能达到该技术要求的指标。对这些种苗第一代主要追求的目标是尽可能的得到更多的原始基础种苗,为第二代后正常生产打下良好基础。植物傻瓜克隆技术可用于绝大多数曾用植物组培茎尖快繁和常规扦插育苗技术可繁殖的植物,或上述两项技术均不适于繁殖的植物;可用于植物育种工作中固定杂种优势;可用于特种转基因植物育苗工程、太空育种新植物、各种新种质材料或濒危经济植物的快繁推广和保护、林木育苗、种子工程和种子产业化;可用于自然突变植株、优良单株及多倍体优势株无性系的选择纯化和大量生产利用;可用于无病毒原种苗的隔离扩繁;可用于国内外新品种引种扩散、杂交育种等等。在这些方面此项技术具有技术的最佳性和市场的相对无穷性。

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